酵母菌的分离筛选方法 _生活经验

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酵母菌的分离筛选方法
1、培养基:1.1葡萄糖 50g/L,尿素1g/L(NH4)2SO41g/L,KH2PO42.5g/L,Na2HPO40.5g/L,MgSO41g/L,FeSO4 0.1g/L,酵母膏 0.5g/L,孟加拉红 0.03g/L,PH4.5-5.0(富集用) 。1.2乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基:马铃薯200g/L,葡萄糖(霉菌用蔗糖)20g/L,乳酸5ml马铃薯去皮切片200g,加水煮沸30min,纱布过滤,补足蒸馏水1L,PH自然。(去掉乳酸可用于酵母菌和霉菌培养用)(富集用) 。1.3麦芽汁培养基:1:4水60-65℃水浴3-4小时,4-6层纱布过滤,可加一个蛋清加水20mL调均生泡沫,倒入糖化液中,煮沸过滤,10-15波林,氯霉素0.1g/L,PH6.0-6.4,121℃,20min 。
2、集菌:研究酵母菌生态和某种基物或样品中的酵母菌区系,一般不进行集菌,以免改变其中不同种类数量间的对比,将样品制成菌悬液按常规法分离。若从样品中分离特定种类时先集菌。集菌发酵力强菌株,加酸性含糖的培养基,酸性豆汁,必要时注入高浓度的酒精(13-17%),霉菌在液体中形成菌丝体,酵母不形成菌丝,25-28℃ 2-3d,遇到菌丝体用接种环挑去烧掉,去掉上清液,取沉淀酵母一至两环移植另一液体培养基中,集菌连续两至三次才能完成,要配合镜检。
3.筛选分离:取集菌液适当稀释,吸取0.1-0.2ml梯度菌液(至少两个两个平衡),涂布于马铃薯-葡萄糖麦芽汁或虎红培养基平板,也可采用混菌法或蘸取集菌菌液直接划线,(平放12h后倒置培养),25℃培养48h,低温酵母菌15℃ 高温酵母菌 35℃ 40℃ 45℃,形成清晰菌落。在培养皿底划分小方格,待菌落生长良好后,用放大镜或低倍镜,观察每格内每个菌落编号并描述,颜色表面边缘切面等,再制片在高倍镜下观察各菌株的个体形态,做好记录。选择不同菌落分别接于麦芽汁斜面,25℃培养48小时备用。
酵母菌的生活史
各种酵母的生活史可分为三种类型: 1、单倍体型 2、双倍体型 3、单双倍体型1、单双倍体型
单双倍体型以啤酒酵母为代表
特点:单倍体营养细胞和双倍体营养细胞均可进行芽殖。营养体既可以单倍体形式也可以双倍体形式存在;在特定条件下进行有性生殖。单倍体和双倍体两个阶段同等重要,形成世代交替。
2、单倍体型
单倍体型以八孢裂殖酵母为代表。
特点:营养细胞是单倍体;无性繁殖以裂殖方式进行;双倍体细胞不能独立生活,因为双倍体阶段短,一经生成立即减数分裂。
3、双倍体型
双倍体型以路德类酵母为代表。
特点:营养体为双倍体,不断进行芽殖,双倍体营养阶段长,单倍体的子囊孢子在子囊内发生接合。单倍体阶段仅以子囊孢子形式存在,故不能独立生活。
酵母菌的生长条件
1、营养
酵母菌同其它活的有机体一样需要相似的营养物质,像细菌一样它有一套胞内和胞外酶系统,用以将大分子物质分解成细胞新陈代谢易利用的小分子物质,属于异养生物。
2、酸度
酵母菌能在PH值为3.0～7.5的范围内生长,最适PH值为4.5～5.0 。
3、水分
像细菌一样,酵母菌必须有水才能存活,但酵母需要的水分比细菌少,某些酵母能在水分极少的环境中生长,如蜂蜜和果酱,这表明它们对渗透压有相当高的耐受性。
4、温度
在低于水的冰点或者高于47℃的温度下, 酵母细胞一般不能生长,最适生长温度一般在20～30℃ 。
5、氧气
【酵母菌的分离筛选方法】酵母菌在有氧和无氧的环境中都能生长,即酵母菌是兼性厌氧菌,在有氧的情况下,它把糖分解成二氧化碳和水且酵母菌生长较快。在缺氧的情况下,酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。

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