PHA淋巴细胞转化试验 _生活经验

【PHA淋巴细胞转化试验】

文章插图
PHA淋巴细胞转化试验是T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时，受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化，部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞，并进行有丝分裂的试验方法。

检查部位：血液血管
科室：肿瘤科,急诊科放疗、化疗科
空腹检查：否
禁忌人群：
参考价格：

PHA淋巴细胞转化试验——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
PHA淋巴细胞转化试验——检查项目的不适宜人群：
暂无内容PHA淋巴细胞转化试验——检查项目的注意细节：
1.培养基成分对转化率影响较大，注意其有效期。
2.小牛血清用前需灭活。
3.培养时要保证有足够的气体，一般10ml培养瓶内液体总量不要超过2ml 。
4.PHA剂量过大对细胞有毒性，太小不足以刺激淋巴细胞转化，试验前应先测定PHA转化反应剂量。
5.实验中要严格无菌操作，防止污染。
不合宜人群：暂时不明。
检查前禁忌：注意健康的饮食，保持良好的心情。
检查时要求：积极配合医生。
PHA淋巴细胞转化试验——检查项目的一般步骤：
操作方法：
1.取无菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml细胞培养液中，同时加入1000μg/m1PHA0.1m1，对照管不加PHA，将细胞置37℃、5%CO2培养3d ，每天摇动1次。
2.培养结束时吸弃大部分上清液，加入8.5g/LNH4Cl4ml混匀，置37℃水浴10min 。
3.2500r/min离心10min，弃上清液，沉淀加5ml固定液，室温作用5min 。
4.2500r/min离心10min，弃上清液，留0.2ml沉淀细胞制片，迅速吹干。
5.吉姆萨染液染色10～20min，水洗，干燥。
6.油镜计数200个淋巴细胞中转化的细胞数，计算转化率。
结果判断：
1.淋巴母细胞的形态学标准细胞核的大小、核与胞浆的比例、胞浆染色性及核的构造与核仁的有无。
⑴成熟的小淋巴细胞：与未经培养的小淋巴细胞大小一样，为6～8μm，核染色致密，无核仁，核与胞浆比例大，胞浆染色为轻度嗜碱性。
⑵过渡型淋巴细胞：比小淋巴细胞大，约10～20μm ，核染色致密，但出现核仁，此为与成熟小淋巴细胞鉴别要点。
⑶淋巴母细胞：细胞体积增大，约20～30μm ，形态不整齐，常有小突出，核变大，核质染色疏松，有核仁1～2个，胞浆变宽，常出现胞浆空泡。
⑷其它细胞：如中性粒细胞在培养72h后，绝大部分衰变或死亡呈碎片。
2.淋巴细胞转化率的计算按上述分类检查推片头、体、尾三部分，计数200个淋巴细胞，算出百分率。转化的淋巴细胞包括淋巴母细胞和过渡型淋巴细胞，未转化的淋巴细胞指的是成熟的小淋巴细胞。在正常情况下，PHA诱导的淋巴细胞转化率为60～80% ，如为50～60%则偏低，50%以下则为降低。
再根据结果得出正确的判断。
PHA淋巴细胞转化试验——检查项目结果解读：
操作方法：
1.取无菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml细胞培养液中，同时加入1000μg/m1PHA0.1m1，对照管不加PHA，将细胞置37℃、5%CO2培养3d ，每天摇动1次。
2.培养结束时吸弃大部分上清液，加入8.5g/LNH4Cl4ml混匀，置37℃水浴10min 。
3.2500r/min离心10min，弃上清液，沉淀加5ml固定液，室温作用5min 。
4.2500r/min离心10min，弃上清液，留0.2ml沉淀细胞制片，迅速吹干。
5.吉姆萨染液染色10～20min ，水洗，干燥。
6.油镜计数200个淋巴细胞中转化的细胞数，计算转化率。
结果判断：
1.淋巴母细胞的形态学标准细胞核的大小、核与胞浆的比例、胞浆染色性及核的构造与核仁的有无。
⑴成熟的小淋巴细胞：与未经培养的小淋巴细胞大小一样，为6～8μm，核染色致密，无核仁，核与胞浆比例大，胞浆染色为轻度嗜碱性。
⑵过渡型淋巴细胞：比小淋巴细胞大，约10～20μm，核染色致密，但出现核仁，此为与成熟小淋巴细胞鉴别要点。
⑶淋巴母细胞：细胞体积增大，约20～30μm，形态不整齐，常有小突出，核变大，核质染色疏松，有核仁1～2个，胞浆变宽，常出现胞浆空泡。
⑷其它细胞：如中性粒细胞在培养72h后，绝大部分衰变或死亡呈碎片。
2.淋巴细胞转化率的计算按上述分类检查推片头、体、尾三部分，计数200个淋巴细胞，算出百分率。转化的淋巴细胞包括淋巴母细胞和过渡型淋巴细胞，未转化的淋巴细胞指的是成熟的小淋巴细胞。在正常情况下，PHA诱导的淋巴细胞转化率为60～80% ，如为50～60%则偏低，50%以下则为降低。
再根据结果得出正确的判断。

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