载脂蛋白CⅢ


载脂蛋白CⅢ

文章插图
载脂蛋白C是极低密度脂蛋白胆固醇的主要载脂蛋白,也存在于高密度脂蛋白-胆固醇和低密度脂蛋白-胆固醇中,有3种不同的载脂蛋白C,即ApoCⅠ、ApoCⅡ、ApoCⅢ,它是CM、VLDL他和HDL的少量结构蛋白 。
  • 检查部位:血液血管
  • 科室:
  • 空腹检查:否
  • 禁忌人群:
  • 参考价格:
载脂蛋白CⅢ——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
载脂蛋白CⅢ——检查项目的不适宜人群:
暂无内容【载脂蛋白CⅢ】载脂蛋白CⅢ——检查项目的注意细节:
(1)免疫透射比浊法:
①关于抗血清:比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高 。比浊法以用多克隆抗体为宜 。抗血清中必须不含杂抗体 。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯,这不是一般实验室都能做到的 。抗血清效价(滴度)不可低于16 。目前国内某些商品试剂中,apoA-Ⅰ抗血清效价极低,选购试剂盒时必须注意 。如果没有在选购前鉴定抗血清质量的经验,应请有条件的单位鉴定之 。
②上法中标本(血清)稀释200倍是为了便于手工操作(加样100μl),如有精密加样器,可作20倍稀释(用10μl) 。为了适合不同实验室的条件(如不同类型的自动化仪器),作适当修改时应注意抗原抗体的比例 , 必须十分注意反应体系中不可有抗原过量 , 线性上限不可低于2.5g/L 。换言之,抗血清用量必须充裕,否则标本中apoA-Ⅰ高水平时测出结果偏低 。目前国内某些商品试剂盒不但抗血清效价过低,操作中所定标本用量又过大(如3~5μl) , 抗体明显不足,测出结果必然不准确 。
③为了达到准确测定的目的,apoA-Ⅰ与B比浊测定(终点法)中必须作校准曲线计算结果 。一定范围(低标本用量)浓度(X)与浊度(Y)基本上成直线关系,直线回归计算出在Y轴上有一定截距(A值<0.1),所以用单点校准计算结果偏差较大,使测出结果不能准确反映浓度的高低(高的偏低,低的偏高) 。千万不要因为单点法简便而忽略了测定的准确性 。无论用何种自动化仪器,必须先试作校准曲线 。如果在所用仪器及特定条件下反复测试,回归线的截距不明显时,才能采用单点校准法 。标本用量在3~5&mu;l时,即使加大抗血清用量,浓度与浊度也不成直线关系,只能用曲线直线化转换后计算 。
④主要干扰因素是血清本身的混浊(如高脂血清),用超离心或脂肪酶水解等标本预处理方法都不实用 。用表面活性剂消浊的作用也有限,所以在测定中必须作标本空白管 。除了自动分析中可采用两点法外 , 手工法用单一试剂而不扣除标本空白的做法是错误的 。为了减少基质效应对浊度反应的影响,必须用定值血清作校准物 。此外,尘埃粒子、比浊皿划痕等干扰也必须排除 。
⑤有的商品试剂盒(包括某些进口产品)所附校准血清定值不准确 , 是误差的重要来源 。
(2)火箭电泳法:
①抗原稀释倍数与抗血清用量的选择,应以火箭峰清晰、校准曲线斜率适中并成直线为宜 。本法同时测定apoA-Ⅰ与apoB,应调整两种抗血清用量,使二者峰高有区别,apoB峰高不小于1cm 。
②不同种类来源的抗血清(如兔与羊) , 在等效价的情况下进行试验 , 结果会有差异 。apoA-Ⅰ测定以兔抗血清为好 。用兔血清时峰形尖细,而羊血清所产生的峰粗 , 峰尖圆钝 , 有时在峰顶前出现虚影 。校准血清所作校准曲线斜率也不同 。但不论用何种抗血清,定量结果差别不大 。
③在一定条件下电泳,不同稀释度校准血清的峰高不会有明显变动 , 校准曲线斜率基本一致 。如标本峰高超出校准曲线范围时,应调整标本稀释倍数后重测 。板间CV通常小于5% 。
④火箭电泳结果可以用染色法或直接肉眼观察可见的火箭峰 。前者用标本少,节省抗血清,但如适当增加标本及抗血清用量,不染色更为方便 。所用琼脂糖应为标准电渗或低电渗的,凝胶中加入适量葡聚糖或聚乙二醇可使火箭峰更清晰 。
⑤火箭峰的测量可以计算面积或峰高,面积是峰高乘以峰宽(峰半高处的宽度) 。测量精度最好能达0.1mm 。须用机械或电子放大设备 。标准曲线范围内峰高以1~4cm为宜 。
⑥本法适用于少量标本分析 。也适用于apoAⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E及Lp(a)测定 。
载脂蛋白CⅢ——检查项目的一般步骤:
静脉抽血
载脂蛋白CⅢ——检查项目结果解读:
静脉抽血

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