2 脑脊液氨基酸 _生活经验

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2、临床意义
正常情况下CSF中氨基酸总量约为血浆中含量的10%-30% 。在各种脑膜炎、脊髓阻塞水平以下变黄时,CSF中氨基酸总量明显升高;晚期神经梅毒轻度升高;多发性硬化症、老年性精神病时降低。
CSF中的氨基酸用色谱法可分离出20余种,氨基酸其临床意义如下。细菌性脑膜炎、脑膜神经根炎、癌脑膜炎、Garin-Bujadox-Bannnarth等CSF谷氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸含量升高。
无菌性脑膜CSF中甘氨酸、亮氨酸升高。结核性脑膜炎、乙型脑炎、脊髓灰质炎CSF色氨酸升高。脑脓肿、全身性感染、精神分裂症甘氨酸、谷氨酸、缬氨酸、门冬氨酸含量升高、精神分裂症还可见丙氨酸增高。肝昏迷、脑出血、癫痫、严重嗜睡病谷氨酰胺升高,而癫痫患者CSF γ-氨基丁酸浓度降低。
许多神经系统变性病如帕金森氏病、运动神经元病、脊髓小脑变性CSF中门冬氨酸升高,谷氨酸降低。癌症、胶质细胞瘤CSF中赖氨酸、苯丙氨酸浓度增高。各种氨基酸尿症患者CSF中的氨基酸可发生相应的变化,如枫糖尿症CSF中缬氨基、亮氨酸、异亮氨酸等支链氨基酸含量常增高,精氨酸血症精氨酸含量升高,赖氨酸尿症CSF中赖氨酸增多。
脑脊液氨基酸的检查过程及注意事项
1、检查过程
脱盐:取已过滤的脑脊液10ml加入装有5ml Dowex-50×8离子交换树脂的层析柱内,用100ml蒸馏水淋洗层析柱,流出液弃去。用2mol/L氨水30ml洗脱氨基酸。洗脱液在40℃真空蒸发,残渣溶于1ml蒸馏水中。
脑脊液用1ml,先经磺基水杨酸40mg去蛋白,离心后取上清液0.5ml加入装有1ml Dowex 50×8的层析柱内,用40ml蒸馏水淋洗层析柱,流出液弃去。用2mol/L氨水15ml洗脱氨基酸。洗脱液在40℃真空蒸发,残渣溶于0.05ml蒸馏水。
点样:在薄层层析板的左下角距二边1.5cm处,点加脑脊液的脱盐浓缩液4μl;点样量以2μg氨基氮为度,且直径愈小愈好。
氧化含硫氨基酸:在点样处加0.5μl含钼酸铵的H2O2,在室温放置30min 。
展层:先将薄层层析板置于盛有第一向溶剂的层析缸中,展层约60min,即溶剂上升至9.5cm处时取出,再在40℃气流中吹30min 。将薄层层析板转90℃再放入盛有第二向溶剂的层析缸中展层约100min,即溶剂上升至9.5cm处时取出在40℃放过夜。
【2 脑脊液氨基酸】向薄层层析板喷洒茚三酮试剂,再置100℃烘箱30min,观察氨基酸的紫蓝色斑点,脯氨酸斑点为黄色。

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