聚合酶链反应技术


聚合酶链反应技术

文章插图
聚合酶链反应技术诊断幽门螺旋杆菌是否存在仅需微量的DNA,而不需要活菌存在(这不同于其他幽门螺旋杆菌检测方法),它不仅可以检测胃内幽门螺旋杆菌,还可望检出胃以外部位,如牙斑、粪便内的幽门螺旋杆菌,还可用于流行病学调查,它的敏感性远远超过了其他方法,有利于确定细菌感染的来源及途径 , 它是一种很有前途的幽门螺旋杆菌检测方法 。
  • 检查部位:胃
  • 科室:消化内科
  • 空腹检查:是
  • 禁忌人群:
  • 参考价格:
聚合酶链反应技术——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
聚合酶链反应技术——检查项目的不适宜人群:
暂无内容聚合酶链反应技术——检查项目的注意细节:
不适宜人群:
(1)凝血功能差者 。
【聚合酶链反应技术】(2)胃血管瘤(质软) 。
检查前禁忌:
1.检查前一天避免吸烟,以免检查时因咳嗽影响插管 。
2.要有成人亲友陪伴,术前取下假牙 。
3.检查前一天晚饭后不应再吃东西,检查当天早晨不应再喝水 。
检查时禁忌:
1.告知医生您的既往病史及药物过敏史 。
2.嘱病人在操作中不要做过多的吞咽动作,防止唾液吸入气道及引起喉头疼痛 。
3.向病人说明胃镜检查的目的 , 鼓励病人树立信心,勿紧张 , 配合医生顺利完成检查 。抽取胃粘膜检查即可 。
4.准备好基因片段,保证电泳完成 。
聚合酶链反应技术——检查项目的一般步骤:
1.材料:标本采自经胃镜检查确诊的胃、十二指肠溃疡、各类胃炎及溃疡合并胃炎病例,在距幽门口5cm内钳取胃粘膜2份(每例检查前2周停用抗HP药物) , 分别作PCR及病理切片检查,检测HP 。
2.研究方法:PCR技术:采用厦门长城生物工程有限公司生产的HPDNAPCR诊断试剂盒,DNA抽提采用水煮沸法,引物为尿素酶基因片段,其核着酸顺序为:引物1为5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT—3' , 引物2为5'-TTATTACGCTTC—3',扩增产物为456bP,94℃预变性5分钟,94℃30秒 , 55℃30秒,72℃1分钟共32个循环,72℃延伸5分钟,2%琼脂糖凝胶电电泳20分钟,BE染色在456bp出现条带为阳性,根据阳性带亮度分别作、定量判断 。
聚合酶链反应技术——检查项目结果解读:
1.材料:标本采自经胃镜检查确诊的胃、十二指肠溃疡、各类胃炎及溃疡合并胃炎病例,在距幽门口5cm内钳取胃粘膜2份(每例检查前2周停用抗HP药物),分别作PCR及病理切片检查 , 检测HP 。
2.研究方法:PCR技术:采用厦门长城生物工程有限公司生产的HPDNAPCR诊断试剂盒,DNA抽提采用水煮沸法,引物为尿素酶基因片段,其核着酸顺序为:引物1为5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT—3',引物2为5'-TTATTACGCTTC—3',扩增产物为456bP,94℃预变性5分钟 , 94℃30秒,55℃30秒,72℃1分钟共32个循环 , 72℃延伸5分钟,2%琼脂糖凝胶电电泳20分钟 , BE染色在456bp出现条带为阳性,根据阳性带亮度分别作、定量判断 。

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