混合淋巴细胞培养试验 _生活经验

文章插图

混合淋巴细胞培养试验的基本信息
1、定义
混合淋巴细胞培养试验(mixedlymphocyteculture,MLC)是一种测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容程度的试验方法,常用于器官移植前的组织配型。混合淋巴细胞培养将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养,或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养,细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关的试验。

2、专科分类
生长发育检查
3、检查分类
免疫检查
4、适用性别
男女均适用
5、是否空腹
非空腹
混合淋巴细胞培养试验的正常值和临床意义
1、正常值
形态计数法: 转化率<10%;同位素计数法:比较cpm得出P>0.05 。
2、临床意义
混合淋巴细胞培养试验为与供-受者相容的程度呈负相关的试验。异常结果:肾移植时,活体供肾者的转化率应<10%;尸体供肾者的转化率应为>10% 。只能在同一批实验中选用低反应配组。淋巴细胞转化率10%者为不同两个体间的组织是相容的。淋巴细胞混合培养试验用以检测患者的免疫状态。T淋巴细胞数减少时,转化率也降低。可作为器官和骨髓移植的配型方法之一,用来选择合适的供体。如转化率高为供受者分歧用。转化率低,移植后的成功率高。
【混合淋巴细胞培养试验】
混合淋巴细胞培养试验的检查过程及注意事项
1、检查过程
供体淋巴细胞的制备:
新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。生理盐水洗涤2次。台盼蓝染色,计数板计数。调整细胞密度为2×109/L,分成3管,各自离心,留取沉淀。每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水,37℃水浴40 min, 生理盐水离心洗涤2次。用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原。标记为D 。
受体淋巴细胞的制备:
新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。生理盐水洗涤2次。用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液调整细胞密度为1×1010/L. 标记为R 。
混合淋巴细胞培养:
将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板,置37℃,50 mL/L CO2孵箱中培养24 h. A组:R 50 μL+D 50 μL;B组:R 50 μL+D 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;C组:R 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;D组:R 50 μL. 每组3个复孔,空白对照组为RPMI 1640培养液100 μL 。

混合淋巴细胞培养试验的详细内容就为您分享到这里，【精彩生活】jing111.com小编为您精选以下内容，希望对您有所帮助：