纤维蛋白肽A _生活经验

文章插图
纤维蛋白肽A(fibrinopepide-A，FPA)是在凝血酶作用下，纤维蛋白原α;(A)链的精-16和甘-17之间的肽链裂解，释放出由1～16个氨基酸组成的纤维蛋白肽A 。
是反映体内凝血活性及纤维蛋白最终形成血栓的可靠指标。

检查部位：血液血管
科室：
空腹检查：否
禁忌人群：
参考价格：￥8-￥60

纤维蛋白肽A——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
纤维蛋白肽A——检查项目的不适宜人群：
暂无内容纤维蛋白肽A——检查项目的注意细节：
(1)采血要顺利不应>45s，且开头2ml弃去，注射器要硅化或用塑料注射器。
(2)采血后立即注入盛有抗凝剂的试管中，并在冰水中迅速混合，若需保存则以经皂土吸附处理后-20℃较妥。
【纤维蛋白肽A】纤维蛋白肽A——检查项目的一般步骤：
抽血化验。
（1）血浆标本的采集：用塑料注射器顺利取静脉血4.5ml（开始的2ml弃去），加入盛有0.5ml抗凝剂（肝素钠500u和aprotinin5000u）的试管中，立即混匀。3000r/min离心20min ，分离血浆，吸上层血浆至另一试管，立即作下一步处理或置－20℃保存。
（2）血浆标本的皂土吸附处理：目的是彻底除去纤维蛋白原。40mg皂土加入45ml的聚丙烯塑料离心管中，加入0.5ml吸附缓冲液，充分混匀，加入1ml血浆，在回旋混合器上震荡混匀，再缓慢震摇10min 。5000r/min离心15min ，吸取上清液至另一试管，再如上法以皂土吸附处理1次。然后吸取上清液1ml加到一预先盛有20g/LTween20溶液50μl的试管中，混匀。最终标本已稀释20倍。
（3）FPA包被：取1μg/ml的FPA溶于包被缓冲液中，加入聚苯乙烯反应板，200μl/孔，加盖，37℃过夜。次日弃孔内液。以洗涤液洗板5次，每次3min，甩干，备用。
（4）FPA标准品：以标本稀释缓冲液配成；25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78ng/ml等6个不同浓度。分别吸取0.9ml于一系列小试管中，再在各管中加入0.1ml的工作浓度的兔抗人FPA 。经皂土吸附处理的待测血浆标本作原倍、1∶2、1∶4倍3个浓度如上操作。上述各管置37℃反应3h 。
（4）从温育后的上述各管中分别吸取200μl加入已包被的FPA的反应板各孔中，置板于37℃保温2h ，洗板5次，甩干。
（6）各孔加HRP-羊抗兔IgG（以标本稀释液稀释至工作浓度）200μl/孔，置板于37℃温育2h，洗板5次，甩干。
（7）各孔加新鲜配制的底物液200μl，37℃避光精确反应3min，各孔立即滴加3mol/LH2SO450μl以终止反应。在酶标上测定各孔的A值（492nm）。
纤维蛋白肽A——检查项目结果解读：
抽血化验。
（1）血浆标本的采集：用塑料注射器顺利取静脉血4.5ml（开始的2ml弃去），加入盛有0.5ml抗凝剂（肝素钠500u和aprotinin5000u）的试管中，立即混匀。3000r/min离心20min，分离血浆，吸上层血浆至另一试管，立即作下一步处理或置－20℃保存。
（2）血浆标本的皂土吸附处理：目的是彻底除去纤维蛋白原。40mg皂土加入45ml的聚丙烯塑料离心管中，加入0.5ml吸附缓冲液，充分混匀，加入1ml血浆，在回旋混合器上震荡混匀，再缓慢震摇10min 。5000r/min离心15min，吸取上清液至另一试管，再如上法以皂土吸附处理1次。然后吸取上清液1ml加到一预先盛有20g/LTween20溶液50μl的试管中，混匀。最终标本已稀释20倍。
（3）FPA包被：取1μg/ml的FPA溶于包被缓冲液中，加入聚苯乙烯反应板，200μl/孔，加盖，37℃过夜。次日弃孔内液。以洗涤液洗板5次，每次3min ，甩干，备用。
（4）FPA标准品：以标本稀释缓冲液配成；25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78ng/ml等6个不同浓度。分别吸取0.9ml于一系列小试管中，再在各管中加入0.1ml的工作浓度的兔抗人FPA 。经皂土吸附处理的待测血浆标本作原倍、1∶2、1∶4倍3个浓度如上操作。上述各管置37℃反应3h 。
（4）从温育后的上述各管中分别吸取200μl加入已包被的FPA的反应板各孔中，置板于37℃保温2h ，洗板5次，甩干。
（6）各孔加HRP-羊抗兔IgG（以标本稀释液稀释至工作浓度）200μl/孔，置板于37℃温育2h，洗板5次，甩干。
（7）各孔加新鲜配制的底物液200μl，37℃避光精确反应3min，各孔立即滴加3mol/LH2SO450μl以终止反应。在酶标上测定各孔的A值（492nm）。

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