泪液乳酸脱氢酶


泪液乳酸脱氢酶

文章插图
泪液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要来自眼角膜上皮 。
它们在泪液中的浓度约为血清中该酶浓度的20倍 。
泪LDH主要含M亚基,以LDH5和LDH4含量最高 。
泪液MDH同工酶,用醋纤膜电泳,可分离出MDHs和MDHm,健康人泪液以MDHs为主 。
  • 检查部位:眼
  • 科室:康复医学科
  • 空腹检查:否
  • 禁忌人群:
  • 参考价格:
泪液乳酸脱氢酶——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
泪液乳酸脱氢酶——检查项目的不适宜人群:
暂无内容泪液乳酸脱氢酶——检查项目的注意细节:
不合宜人群:一般无特殊人群
【泪液乳酸脱氢酶】检查前禁忌:用手揉眼睛 , 这样会使眼睛感染,加重病情 , 影响检查效果
检查时要求:配合医生指示做好相关检查
泪液乳酸脱氢酶——检查项目的一般步骤:
(1)比色法:
①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物 , 但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应 。而乳酸锂为固体 , 稳定,易于称量 。
②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率 。
③比色应在5~15min内完成,否则吸光度降低 。
④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数 。
(2)连续监测法:
①标本勿溶血,当溶血达Hb0.8g/L时,LDH活性可升高58% 。
②标本于室温(25℃)保存,2天内酶活性稳定,冰箱保存酶活性降低,-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活 。
③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意,草酸盐可抑制LDH活性 。
④复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去 。
⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性 , 但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同,其参考区间也有差异 。以乳酸和NAD为底物,在340nm监测吸光度增高速率为正向反应,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物,监测340nm吸光度下降速率为逆向反应,以LD-P表示 。正逆反应两法相比,LD-L法的主要优点是:A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大,前者冰箱可保存6个月以上,而后者仅几天;B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽;C.重复性比LD-P好 。由于逆向反应速度比正向反应速度快,其参考值约为LD-L的2倍 。
泪液乳酸脱氢酶——检查项目结果解读:
(1)比色法:
①乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物 , 但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应 。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量 。
②除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率 。
③比色应在5~15min内完成,否则吸光度降低 。
④结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数 。
(2)连续监测法:
①标本勿溶血 , 当溶血达Hb0.8g/L时 , LDH活性可升高58% 。
②标本于室温(25℃)保存,2天内酶活性稳定,冰箱保存酶活性降低,-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活 。
③用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意 , 草酸盐可抑制LDH活性 。
④复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去 。
⑤利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性,但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同,其参考区间也有差异 。以乳酸和NAD为底物 , 在340nm监测吸光度增高速率为正向反应,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物,监测340nm吸光度下降速率为逆向反应,以LD-P表示 。正逆反应两法相比,LD-L法的主要优点是:A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大,前者冰箱可保存6个月以上,而后者仅几天;B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽;C.重复性比LD-P好 。由于逆向反应速度比正向反应速度快,其参考值约为LD-L的2倍 。

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