血清补体溶解免疫复合物活性

【血清补体溶解免疫复合物活性】

血清补体溶解免疫复合物活性

文章插图
在补体的CRA中 , 旁路激活途径(AP)起主导作用 , 传统激活途径仅为促进作用 。
补体CRA的机制是 , 在补体与IC相互作用时,AP的C3转化酶大量裂解C3,形成的大量C3b嵌入到抗原抗体的格子状结构中并牢固与抗体结合,使部分抗原抗体的结合键断裂,较大的IC凝聚物变为较小的凝聚物,从而溶解于液相中 。
  • 检查部位:血液血管
  • 科室:
  • 空腹检查:否
  • 禁忌人群:
  • 参考价格:
血清补体溶解免疫复合物活性——检查细节、注意事项、步骤、结果解读
血清补体溶解免疫复合物活性——检查项目的不适宜人群:
暂无内容血清补体溶解免疫复合物活性——检查项目的注意细节:
酶-抗酶法:
(1)补体并非对所有抗原抗体复合物都溶解 , 只能溶解可溶性抗原(多糖、蛋白、半抗原等)形成的IC 。
(2)其他注意事项同酶免疫技术节 。
血清补体溶解免疫复合物活性——检查项目的一般步骤:
(1)酶-抗酶法:
①取HRP-抗HRP复合物0.2ml,加待测血清0.1ml,置尖底离心管,于37℃水浴1h,时时摇动混匀 。
②加入PBS1ml , 3000r/min , 离心15min 。
③取上清0.5ml加底物溶液0.4ml,37℃1h呈色 。加1mol/LNaOH0.1ml终止反应,再加入PBS3ml , 测450nm吸光度 。
④用PBS0.1ml代替待测血清作为对照管调零 。
(2)放射免疫法:
①试验组:
A.用含Ca2+、Mg2+明胶巴比妥缓冲液1∶3稀释待测血清45μ1,125IBSA-抗BSA复合物悬液5μl37℃15min加冷PBS(pH7.20.15mol/L)1ml 。
B.1800r/min离心20min,弃上清,用γ-闪烁计数仪测沉淀cpm 。
②对照组:自然溶解,正常人混合血清56℃灭活30min取45μl 。
正常溶解:正常人混合新鲜血清,取45μl 。对照组所加其他试剂同实验组 。
血清补体溶解免疫复合物活性——检查项目结果解读:
(1)酶-抗酶法:
①取HRP-抗HRP复合物0.2ml,加待测血清0.1ml , 置尖底离心管,于37℃水浴1h , 时时摇动混匀 。
②加入PBS1ml,3000r/min,离心15min 。
③取上清0.5ml加底物溶液0.4ml , 37℃1h呈色 。加1mol/LNaOH0.1ml终止反应 , 再加入PBS3ml,测450nm吸光度 。
④用PBS0.1ml代替待测血清作为对照管调零 。
(2)放射免疫法:
①试验组:
A.用含Ca2+、Mg2+明胶巴比妥缓冲液1∶3稀释待测血清45μ1,125IBSA-抗BSA复合物悬液5μl37℃15min加冷PBS(pH7.20.15mol/L)1ml 。
B.1800r/min离心20min,弃上清,用γ-闪烁计数仪测沉淀cpm 。
②对照组:自然溶解,正常人混合血清56℃灭活30min取45μl 。
正常溶解:正常人混合新鲜血清,取45μl 。对照组所加其他试剂同实验组 。

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